1、用過濾和脫氣的流動相（不含緩沖鹽）*沖洗色譜儀的泵和管路，務必使系統中不含氣泡。

 

　　2、根據色譜柱上所標示的流動相流向，將色譜柱入口與泵端管路相連，柱出口不連。

 

　　3、將泵的流速設為0.1mL/min或更低，流速緩慢地上升到正常流速。

 

　　4、當溶劑從色譜柱出口端自由流出時，將流速設為0，把柱出口與檢測器端的管路相連。

 

　　5、用10－30倍柱體積的流動相、正常流速平衡色譜柱。

 

　　6、氨基柱、氰基柱既可在正相環境下使用，也可在反相環境下工作。當需要從反相變為正相或正相變為反相時，需要用20－30倍柱體積的THF作為過渡溶劑沖洗系統，否則易使泵的單向閥堵塞，出現壓力異常的現象。

 

　　19095F-123色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。

 

　　在后兩種情況發生時，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出再把柱內填料整平。然后用適當溶劑濕潤的固定相(與柱內相同)填滿色譜柱，壓平，再擰緊柱接頭。

 

　　這樣處理后柱效能得到改善，但是很難恢復到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱，可以起到保護、延長柱壽命的作用。采用保護柱會損失一定的柱效，這是值得的。

 

　　通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上。以硅膠為基質的填料，只能在pH=2～9范圍內使用。柱子使用一段時間后，可能有一些吸附作用強的物質保留于柱頂，特別是一些有色物質更易看清被吸著在柱頂的填料上。